透明质酸凝胶组合物、其制造方法及含该组合物的医用材料
2019-11-22

透明质酸凝胶组合物、其制造方法及含该组合物的医用材料

一种透明质酸凝胶组合物,其特征为包含透明质酸和高分子化合物,基本上未经化学交联剂或化学修饰剂修饰,且浸入37℃中性水溶液中12小时透明质酸的溶出百分率为50%或更低。

背景技术

比较例1实施例1中不调整混合水溶液的pH,将中性溶液冻结、解冻、重复8次。结果,透明质酸水溶液不发生变化。即,不发生胶凝。第9次冻结后,进行冷冻干燥,得到海绵状的透明质酸组合物。

由表5、6可见,凝胶组合物不管组成比如何,通过凝胶化可使透明质酸、羧甲基纤维素两者均难以溶出。

结果如表9所示。可见实施例24~27的透明质酸凝胶组合物的膜破裂时所加重量比比较例6的仅含透明质酸凝胶的膜的干燥强度大大提高。

考察实验No.16的实施例2所得的透明质酸凝胶组合物的溶解百分率,透明质酸经1日后溶解百分率为0%,4日后为1%,10日后为3%。而聚乙烯醇1日后溶解百分率为0%,4日后为1%,而10日后为1%。

实施例10将分子量为2×106道尔顿的透明质酸钠溶解至浓度为0.5质量%。用1mol/L盐酸调整pH至调整后的水溶液的pH为1.5。取酸性水溶液15ml置30ml的玻璃瓶中,放入设定温度为-20℃的冷冻库。放置5日后,于25℃解冻,将所得的海绵状透明质酸凝胶用微量匀浆器(Polytoron,Kinematica AG制)粉碎,得破碎的透明质酸凝胶。

至于组织的状态,在埋入实施例14~16的透明质酸凝胶组合物防粘连材料和比较例4的透明质酸组合物防粘连材料的局部组织其状态未见异常,而比较例5所得的氰尿酰氯交联的透明质酸组合物,其组织见轻度炎症。

由于冻结、解冻时间可以缩短,最好选用-5℃以下作冻结温度,选5℃以上作解冻温度。而时间只要是在该温度冻结、解冻结束的时间以上,没有特别限制。

透明质酸浓度的测定磷酸缓冲的生理盐水中的透明质酸可使用GPC进行测定。透明质酸具高分子量,因此首先洗脱,然后低分子的羧甲基纤维素、聚乙烯醇被洗脱。透明质酸的浓度,可用示差折光检测器从透明质酸洗脱峰的面积求出。

通过测定创口面积随时间的变化而进行治疗效果的比较。即用下式求出与最初创口面积的面积比,检测其随时间的变化。

表7透明质酸凝胶防粘连试验

按照上述,具体进行了实施例1~3的透明质酸凝胶组合物、参考例1的透明质酸凝胶、以及比较例1~3的透明质酸组合物的溶解性试验。其结果如表1所示。

实施例13将透明质酸钠(分子量2×105道尔顿)溶于蒸馏水使浓度为1质量%,用1N硝酸调整水溶液的pH至1.5。另外,取25℃时1%粘度为150~250mPa·s的羧甲基纤维素钠(醚化值0.62~0.68、换算分子量为1.28×105~1.35×105道尔顿、第一工业制药制)溶于蒸馏水,使浓度为1质量%,这样配制的水溶液的pH以1mol/L硝酸调整至1.5。两种酸性水溶液以2:1的体积比混合,将混合液100ml倒入容器(面积:16cm×16cm),置于设定温度为-20℃的冷冻库中。放置3日后,于25℃解冻,得海绵状的透明质酸/羧甲基纤维素凝胶组合物。再用双蒸馏水置换过量的酸溶液后,用100mmol/L的磷酸缓冲生理盐水洗涤所得的凝胶组合物3次,使其完全中和。中和后,凝胶于室温晾干,得HA/CMC凝胶膜。

实施例21透明质酸凝胶组合物的细胞毒性试验来自正常人皮肤的成纤维细胞培养物与本发明所得的透明质酸凝胶组合物在非接触状态下共存,观察细胞增殖情况,评价其细胞毒性。将以实施例12~19的方法制作的凝胶组合物用机械粉碎,取20mg置于フアルコン公司制的细胞培养垫(孔径:3μm)中,浸入接种有细胞的培养基。将在透明质酸凝胶组合物非共存时的培养物作为对照组。

实施例23凝胶创口复盖材料在大鼠皮肤缺损模型中的创伤治疗效果试验取7周龄(约200g)的Wistar系雌性大鼠,背部剃毛,于乙醚麻醉下用眼科剪于背部皮肤除去直径2cm的圆片,制作皮肤完全缺损的创口。设置无处理组,仅用医用无纺布(40×40mm:2块重叠)包裹,而处理组,则用比较例4、5及实施例14制成的组合物(30×30mm)复盖创面后,用医用无纺布(40×40mm,2块重叠)包裹。每组用6只大鼠。医用无纺纱布用粘合绷带设定,再用胶带固定。